IP-MS

IP-MS技术结合了免疫沉淀(IP)和质谱(MS)分析。免疫沉淀利用特异性抗体识别并结合目标蛋白,从而将目标蛋白及其相互作用蛋白从复杂的蛋白质混合物中分离出来。质谱分析则用于对分离出的蛋白质进行鉴定和定量分析。通过这种方法,可以研究蛋白质之间的相互作用以及蛋白质复合物的组成。

背景说明

IP-MS用于鉴定目标蛋白与其相互作用的蛋白质,绘制蛋白质相互作用图谱,研究信号通路中关键蛋白质的相互作用网络。这种技术广泛应用于研究蛋白质相互作用网络、翻译后修饰以及疾病相关生物标志物的筛选。

从细胞或组织中提取蛋白质,通常通过裂解液处理以释放蛋白质复合物。将特异性抗体与目标蛋白结合,形成抗原-抗体复合物。然后使用磁珠或琼脂糖珠捕获这些复合物。用洗涤缓冲液去除非特异性结合的蛋白质,以提高实验的特异性和准确性。再将目标蛋白及其相互作用蛋白从磁珠或琼脂糖珠上洗脱下来。通过液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)对洗脱的蛋白质进行分离和鉴定。质谱分析可以提供蛋白质的分子量、氨基酸序列等信息,从而确定蛋白质的身份。利用生物信息学工具对质谱数据进行分析,鉴定蛋白质及其相互作用,并进行定量分析和功能注释。

服务流程

客户在线下单——订单/实验材料确认——样品制备——酶解消化——肽段纯化——质谱分析——数据检索——生物信息学分析——项目报告

服务内容及说明

适用场景

蛋白质互作网络解析;

信号通路及功能注释;

筛选疾病相关互作靶点等。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写:细胞名称、培养方式、转染要求、载体信息、抗性筛选等信息,细胞及载体可选自行提供或我司提供。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、实验原始数据;

2、生物信息学分析;

3、结题报告等。

文献案例

图 IP-MS筛选蛋白TET1的互作蛋白(Zhang et al., 2020)

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