细胞分选技术在生物医学研究和临床诊断中扮演着关键角色。传统方法虽然广泛应用,但往往面临着标记物依赖、细胞损伤等挑战。拉曼辅助细胞分选(Raman-Assisted Cell Sorting,RACS)的创新出现,为我们提供了一种全新的解决方案。
拉曼辅助细胞分选巧妙地将拉曼光谱技术与微流控技术相结合,实现了基于细胞生化特性的无损、无标记分选。拉曼光谱作为一种非侵入式分析方法,通过检测分子的振动频率,能够提供细胞化学组成的详细信息[1]。这种无标记策略独特地将细胞的表型功能与其基因型特征关联起来,为细胞研究开辟了新途径。
细胞分选领域长期面临着一个核心挑战:如何在复杂混合体系中实现高通量且保持细胞活性的分离。传统方法多采用“捕获-释放”机制,但其性能常常受到拉曼信号弱、细胞尺寸、介质电导率、折射率以及流速等多重因素的限制。
为了突破这些限制, RACS系统采用先进的三维流体动力聚焦技术。这一系统能够实现对单个细胞的连续、自动分选,依据其拉曼光谱特征精确引导细胞流向不同通道,为复杂细胞体系提供了更高效、更可靠的分选解决方案。
一、RACS系统构建:高效分选的关键
在拉曼辅助细胞分选系统中,三个关键组成部分协同工作,共同提升了分选效率和样本纯度:
1.在检测腔内精准识别目标细胞
2.当目标细胞流经分选通道网络中的光学传感器时进行实时识别
3.通过高精度压力控制单元,将目标细胞准确导入收集通道
一个完整的RACS系统包含以下核心组件:
- 点成Elveflow OB1压力驱动式流体控制器:提供稳定精确的压力控制
- 流量传感器:可选MFS(适用于水基溶液,精度为5%)或BFS(免校准,精度高达0.2%)
- 流体分配歧管:确保流体分配的均匀性
- 储液瓶:提供稳定的样品来源
- 完整配件包:包括连接头、管路、过滤器等,确保系统完整性
- Elveflow控制软件与软件开发工具包:实现便捷的系统控制和定制化开发
- 三维流体聚焦拉曼辅助细胞分选装置:核心技术组件
分选装置[2]
二、RACS的广泛应用前景
拉曼光谱技术能够提供细胞内在生化特征的详细信息,可用于表征细胞的表型、代谢活性及功能。基于这一优势,拉曼辅助细胞分选在生物学、医学及生物技术等多个领域展现出巨大应用潜力。主要应用领域包括:
- 细胞分选
RACS能够根据细胞的化学成分进行无标记分选,特别适用于稀有细胞的分选,如循环肿瘤细胞、干细胞和免疫细胞等。 - 疾病诊断
通过分析细胞或组织的拉曼光谱,RACS可辅助疾病的早期诊断。例如,可用于血液或组织样本中癌症及其他疾病的检测,也可基于药物反应对细胞进行分选。 - 药物研发
RACS可通过分析不同化合物处理后的细胞拉曼光谱,帮助识别新的药物靶点,并准确评估药效。 - 组织工程
RACS可用于组织工程中的精确细胞分选,如用于构建人工组织或器官。 - 其他专业应用
- 免疫表型分析
- DNA细胞周期/肿瘤倍体分析
- 基因表达研究
- DNA降解分析
- 酶活性研究
三、结语
总体而言,RACS作为一种无标记、非侵入式的细胞分选与分析方法,具有革新多个领域研究与临床实践的潜力。随着技术的不断完善和成本的降低,RACS有望成为细胞分析领域的重要工具,为精准医疗和基础研究提供强有力的技术支持。点成Elveflow致力于提供先进的微流控解决方案, RACS系统集成了最新的技术创新,为研究人员提供可靠、高效的实验平台,推动科学发现的边界不断拓展。
参考文献
[1] Hulett, H. R., Bonner, W. A., Barrett, J., & Herzenberg, L. A. (1969). Cell sorting: automated separation of mammalian cells as a function of intracellular fluorescence. Science, 166(3906), 747-749.
[2] Lyu, Y., Yuan, X., Glidle, A., Fu, Y., Furusho, H., Yang, T., & Yin, H. (2020). Automated Raman-based cell sorting with 3D microfluidics. Lab on a Chip, 20(22), 4235-4245.
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