BCL-XL/CRBN PROTAC试剂盒：推动肿瘤选择性蛋白降解疗法开发的标准化工具

一、PROTAC技术的发展现状与核心价值

靶向蛋白降解嵌合体技术（PROTAC）是一种革命性的药物开发平台，能够利用细胞自身的泛素-蛋白酶体系统来选择性降解致病蛋白质。与传统抑制剂相比，PROTAC技术通过事件驱动的催化降解模式，展现出独特优势：

•克服耐药性：通过消除整个靶蛋白，可有效应对因突变或过表达等机制产生的药物耐受。

•拓展可成药靶点：理论上可靶向缺乏催化活性口袋或传统上难以成药的蛋白，如转录因子、支架蛋白等。

•高选择性：双靶向机制可实现更高的亚型或组织选择性。

凭借这些巨大潜力，PROTAC领域吸引了全球众多顶尖制药公司与生物科技企业的广泛布局。目前已有约20种PROTAC候选药物进入临床研究阶段，其中进展最快的项目已进入III期临床试验，充分验证了其在癌症及其他疾病治疗中的广阔前景。

二、E3连接酶的核心作用与CRBN的重要性

PROTAC分子通常由靶蛋白配体、E3连接酶配体及连接子三部分构成。其作用机制关键在于同时招募靶蛋白与E3泛素连接酶，形成三元复合物，从而诱导靶蛋白的多聚泛素化及随后的蛋白酶体降解。

在众多E3连接酶中，Cereblon（CRBN）是应用最广泛、研究最深入的E3之一，基于CRBN的PROTAC在口服生物利用度和分子特性方面常展现出良好的成药性。然而，开发高效、特异的PROTAC分子，尤其是针对抗凋亡蛋白BCL-XL这类具有重要生理功能的靶点，仍面临巨大挑战，其核心难题之一在于区分肿瘤细胞与正常组织（如血小板）中的降解活性。

三、BCL-XL靶向PROTAC开发的关键挑战：选择性降解

BCL-XL是BCL-2蛋白家族的关键成员，在多种肿瘤细胞中过表达并介导凋亡抵抗，是重要的抗肿瘤靶点。然而，由于BCL-XL对维持血小板存活至关重要，传统抑制剂（如ABT263）常伴随严重的剂量限制性血小板毒性，极大地限制了其临床应用。

因此，开发靶向BCL-XL的PROTAC降解剂的核心目标，是构建能够选择性降解肿瘤细胞中的BCL-XL，同时最大限度保护血小板功能的分子。这需要对CRBN配体、连接子化学以及三元复合物形成动力学进行精细的理性设计与优化，并对候选分子进行严格的体外功能验证。

四、BCL-XL/CRBN PROTAC试剂盒：赋能精准研发与药效评价

为解决上述挑战，并加速高质量的BCL-XL/CRBN PROTAC分子的发现与优化过程，标准化的BCL-XL/CRBN PROTAC试剂盒应运而生。该试剂盒提供了一套全面、可靠且易于操作的体外研究平台，涵盖从机制验证到功能评估的关键环节：

1. 三元复合物形成与结合亲和力分析

• 通过基于时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）或AlphaLISA等均相检测技术，试剂盒可定量评估候选PROTAC分子介导BCL-XL与CRBN E3连接酶形成三元复合物的效率，这是触发有效降解的先决条件。

2. 靶蛋白降解效力与选择性评估

• 提供优化的细胞培养与处理方案，用于精确测定候选分子在不同细胞系（如特定肿瘤细胞系）中的BCL-XL降解效率，计算其半数降解浓度（DC50）和最大降解深度（Dmax）。

• 更重要的是，试剂盒包含在血小板或血小板前体细胞中评估BCL-XL降解活性与细胞毒性的标准化方法，直接评估其对血小板的潜在毒性，为筛选高选择性分子提供关键数据。

3. 功能验证与协同效应研究

• 通过集成的细胞活力检测（如CellTiter-Glo），评估BCL-XL降解后诱导的肿瘤细胞凋亡效应，计算其半数有效浓度（EC50）。