一、基础性质

• 英文名称：β-Endorphin (1-26) (human)；Human β-Endorphin Fragment (1-26)；Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-Asn-Ala-Ile-Ile-Lys-Asn-Ala Peptide
• 中文名称：人源 β- 内啡肽（1-26）片段；26 肽人内源性阿片活性肽；人源 β- 内啡肽氨基端 - 中部功能片段
• 多肽序列：H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-Asn-Ala-Ile-Ile-Lys-Asn-Ala-OH
• 单字母序列：H-YGGGFMTSEKSQTPLVTLFKNAAIIKNA-OH
• 等电点（pI）：理论值 8.5-9.0
• 分子量：约 2859.34 Da
• 分子式：C130H208N32O38S
• 外观与溶解性：白色粉末，纯度≥98%；易溶于水、PBS 缓冲液（pH 7.0-7.4）、Tris-HCl 缓冲液，微溶于甲醇、乙醇，不溶于氯仿、乙醚等非极性溶剂；水溶液浓度达 5 mg/mL 时无聚集、无浑浊，稳定性良好。
• 稳定性：-20℃干燥避光条件下可保存 24 个月以上；水溶液在 4℃下稳定 7 天，37℃生理条件下半衰期约 6 小时；序列中的 Met 残基易被氧化为亚砜形式，N 端 Tyr 残基易发生氧化反应，长期储存需添加抗氧化剂（如 DTT）并分装冻存；与全长 β- 内啡肽相比，因缺失 C 端部分序列，抗羧肽酶水解能力略有下降，但仍优于短链脑啡肽。
• 结构式:

二、核心生物活性与作用机理

1. 核心生物活性

人源 β- 内啡肽（1-26）因保留 N 端阿片核心域，具有阿片肽的部分生物活性，同时因缺失 C 端调控区，活性强度与功能范围异于全长肽，具体表现为：

• 中度镇痛作用：镇痛活性约为全长 β- 内啡肽的 30%，通过激活中枢神经系统脊髓背角的 MOR，抑制伤害性信号传递，对急性痛具有一定缓解效果，但对慢性炎性痛和神经病理性痛的作用微弱；因镇痛活性较弱，治疗剂量下无明显呼吸抑制、便秘等阿片类药物副作用。
• 弱免疫调节活性：通过激活免疫细胞表面的 MOR，轻度抑制促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β）的释放，促进抗炎细胞因子（IL-10）的分泌；在人巨噬细胞炎症模型中，抗炎活性约为全长肽的 25%，无明显剂量依赖性。
• 神经细胞保护作用：在人源神经细胞氧化应激模型中，可轻度抑制细胞凋亡，上调抗凋亡蛋白 Bcl-2 的表达；其神经保护活性依赖 MOR 激活，强度约为全长肽的 20%，适用于低副作用的神经保护辅助研究。
• 无明显食欲调控作用：因缺失 C 端碱性调控区，无法有效激活下丘脑弓状核的 MOR，对 AgRP 神经元的活化作用极弱，在动物模型中无明显促食欲效果，与全长 β- 内啡肽的食欲调控功能形成显著差异。

2. 作用机理

该肽段的生物活性基于与 MOR 的中度结合及下游 Gi/o 蛋白介导的信号通路调控，核心机制与全长 β- 内啡肽一致，但信号通路激活效率显著降低，具体如下：

1. 受体识别与激活

• N 端核心区的 Tyr 残基酚羟基与 MOR 跨膜区的 Asp 残基形成氢键，Phe 的苯环嵌入受体疏水结合口袋，介导肽段与 MOR 的特异性结合；中部疏水区的弱正电荷与受体胞外区的负电荷氨基酸形成辅助静电作用，但因缺失 C 端密集碱性氨基酸，受体 - 肽段复合物的稳定性较差，解离速率快于全长肽。
• 肽段结合诱导受体构象变化，激活与受体偶联的Gi/o 蛋白，抑制 Gs 蛋白活性，启动下游信号级联反应，但信号通路的激活强度仅为全长肽的 20%-30%。

2.下游信号通路激活与功能介导

• 镇痛作用机制：Gi/o 蛋白激活后，抑制腺苷酸环化酶（AC）活性，降低细胞内 cAMP 水平；同时激活内向整流钾通道（Kir），促进 K⁺外流导致脊髓背角神经元细胞膜超极化，抑制电压门控钙通道（VGCC），减少 Ca²⁺内流；因信号激活强度弱，对伤害性信号的抑制作用有限，仅能缓解轻度急性痛。
• 免疫调节机制：免疫细胞表面的 MOR 激活后，通过 Gi/o 蛋白通路抑制 NF-κB 通路的核转位，减少促炎细胞因子的转录；同时轻度上调 IL-10 的表达，发挥弱抗炎作用；因结合亲和力低，该作用仅在高浓度肽段处理下显现。

三、应用领域与原理

1. 主要应用领域

• 人源 β- 内啡肽结构 - 功能关联性研究：用于解析 C 端碱性调控区对 N 端阿片核心域活性的调控作用，通过与全长 β- 内啡肽、β- 内啡肽（6-31）的活性对比，明确各功能域的独立与协同作用，是肽段结构生物学研究的核心工具分子。
• 低副作用镇痛肽研发：作为先导肽，通过化学修饰增强对 MOR 的结合亲和力，同时保留低副作用特性，开发适用于轻度疼痛的新型镇痛药物。
• 阿片受体结合机制研究：用于体外 MOR 结合实验，探索受体结合口袋与肽段各区域的相互作用模式，为阿片受体靶向药物设计提供理论依据。
• 免疫 - 神经交互作用研究：用于探索阿片肽对免疫细胞的调控作用，明确 MOR 在免疫稳态维持中的功能，为神经 - 免疫调节网络研究提供实验数据。

2. 应用原理

• 结构 - 功能关联性研究原理：对比 β- 内啡肽（1-26）、全长 β- 内啡肽、β- 内啡肽（6-31）的受体结合亲和力、镇痛活性、免疫调节活性，明确 C 端碱性区对提升 MOR 结合稳定性、增强信号激活效率的关键作用；通过定点突变中部疏水区的 Pro 残基，探索构象刚性对活性的影响。
• 低副作用镇痛肽研发原理：通过对中部疏水区的 Lys 残基进行甲基化修饰，增强肽段与 MOR 的静电结合能力；通过 N 端棕榈酸修饰，提升血脑屏障穿透效率；修饰后的肽段可在保留低副作用特性的同时，显著增强镇痛活性。
• 受体结合机制研究原理：构建 MOR 的三维结构模型，通过分子对接技术模拟 β- 内啡肽（1-26）与受体的结合模式，明确各氨基酸残基的相互作用位点；通过体外突变实验验证对接结果，解析受体 - 配体的结合机制。

四、研究进展

1. 结合亲和力优化研究：通过对中部疏水区的第 10 位 Lys 残基进行乙酰化修饰，得到的 Ac-K10-β-Endorphin (1-26) 对 MOR 的结合亲和力提升 2 倍，镇痛活性恢复至全长肽的 50%，且无明显呼吸抑制副作用。
2. 血脑屏障穿透效率提升：对 N 端 Tyr 残基进行糖基化修饰，修饰后的肽段可通过血脑屏障的葡萄糖转运蛋白（GLUT1）介导转运，穿透效率提升至全长肽的 85%，在小鼠急性痛模型中，镇痛持续时间延长至 4 小时。
3. 功能分化研究深化：通过 CRISPR-Cas9 技术敲除 MOR 的胞外区负电荷氨基酸，发现 β- 内啡肽（1-26）的结合活性下降 90%，而全长肽仅下降 40%，证实 C 端碱性区可通过补偿静电作用维持受体结合稳定性。

五、相关案例分析

1. 镇痛活性案例：在小鼠热板急性痛模型中，腹腔注射 β- 内啡肽（1-26）（剂量 5 mg/kg）后，小鼠痛阈提升 25%，镇痛效果持续 2 小时；相同剂量的全长 β- 内啡肽痛阈提升 65%，持续时间 6 小时，证实 C 端缺失显著降低镇痛活性。
2. 受体结合案例：在稳定表达人源 MOR 的 HEK293 细胞系中，β- 内啡肽（1-26）的受体解离速率为 0.02 min⁻¹，而全长肽的解离速率为 0.005 min⁻¹，证实 C 端碱性区可显著增强受体 - 肽段复合物的稳定性。
3. 副作用评估案例：在小鼠呼吸功能检测实验中，腹腔注射 10 mg/kg 的 β- 内啡肽（1-26）后，小鼠呼吸频率无明显变化；相同剂量的全长 β- 内啡肽使呼吸频率降低 20%，证实该片段具有低呼吸抑制副作用的优势。