一、基础性质

• 英文名称：β-Casomorphin (human)；Human β-Casomorphin；Tyr-Pro-Phe-Val-Glu-Pro-Ile Peptide；YPFVEPI peptide
• 中文名称：人源 β- 酪啡肽；7 肽食品源性阿片肽；β- 酪蛋白酶解活性片段
• 多肽序列：H-Tyr-Pro-Phe-Val-Glu-Pro-Ile-OH
• 单字母序列：H-YPFVEPI-OH
• 等电点（pI）：理论值 5.5-6.0
• 分子量：约 864.01Da
• 分子式：C44H61N7O11
• 外观与溶解性：白色粉末，纯度≥98%；易溶于水、PBS 缓冲液（pH 6.5-7.4）、稀醋酸溶液，微溶于甲醇、乙醇，不溶于氯仿、乙醚等非极性溶剂；水溶液浓度达 5 mg/mL 时无聚集、无浑浊，稳定性良好。
• 稳定性：-20℃干燥避光条件下可保存 24 个月以上；水溶液在 4℃下稳定 14 天，37℃生理条件下半衰期约 12 小时；序列中 3 个 Pro 残基的刚性吡咯烷环结构，显著增强抗蛋白酶水解能力；Tyr 残基易被氧化，长期储存需添加抗氧化剂（如维生素 C）并避光保存；与短链脑啡肽相比，该肽段抗肠道酶降解能力更强，可部分透过肠道黏膜屏障发挥作用。
• 结构式：

二、核心生物活性与作用机理

1. 核心生物活性

人源 β- 酪啡肽通过中度激活 MOR 及弱激活 DOR，发挥以胃肠道功能调控为主的生物学作用，因分子量小且具有一定肠道穿透性，同时兼具外周与轻微中枢效应，具体表现为：

• 胃肠道功能调控作用：通过激活胃肠道平滑肌细胞表面的外周 MOR，抑制胃肠道蠕动，延长胃排空时间，减少肠道分泌；在小鼠肠道离体模型中，可显著降低肠道收缩频率和幅度，对腹泻模型具有轻微止泻效果；同时可调节肠道菌群平衡，促进双歧杆菌等有益菌增殖，改善肠道微生态。
• 弱镇痛作用：通过激活外周感觉神经末梢的 MOR，抑制伤害性信号的外周传导，对轻度炎性痛具有缓解效果；因血脑屏障穿透效率低（仅约 5% 可进入中枢），中枢镇痛作用微弱，且无明显呼吸抑制、成瘾性等中枢副作用。
• 免疫调节活性：通过激活免疫细胞（淋巴细胞、巨噬细胞）表面的阿片受体，轻度抑制促炎细胞因子（TNF-α、IL-6）的释放，促进抗炎细胞因子（IL-10）的分泌；在肠道黏膜免疫中，可增强黏膜屏障功能，减少肠道内毒素的移位，对肠道炎症具有轻微缓解作用。
• 代谢调节潜力：在体外脂肪细胞模型中，可轻度促进脂肪合成，抑制脂肪分解；该作用依赖 MOR 激活，在动物模型中表现为低剂量下体重轻度增加，高剂量下无明显代谢紊乱，与其他阿片肽的强代谢调控作用存在差异。

2. 作用机理

该肽段的生物活性基于与外周 MOR 的特异性结合及下游 Gi/o 蛋白介导的信号通路调控，核心机制如下：

1. 受体识别与激活

• N 端 YPF 结构域的 Tyr 酚羟基与 MOR 跨膜区的 Asp 残基形成氢键，Phe 苯环嵌入受体疏水结合口袋，Pro 残基维持构象稳定，介导肽段与外周 MOR 的特异性结合；中部 VEPI 区域的疏水侧链增强肽段与细胞膜的结合，提升受体结合效率。
• 肽段结合诱导 MOR 构象变化，激活与受体偶联的Gi/o 蛋白，抑制 Gs 蛋白活性，启动下游信号级联反应。

2.下游信号通路激活与功能介导

• 胃肠道调控机制：胃肠道平滑肌细胞的 Gi/o 蛋白激活后，抑制腺苷酸环化酶（AC）活性，降低细胞内 cAMP 水平；同时激活内向整流钾通道（Kir），促进 K⁺外流导致细胞膜超极化，抑制电压门控钙通道（VGCC），减少 Ca²⁺内流；最终抑制平滑肌细胞的收缩，减慢胃肠道蠕动。
• 外周镇痛机制：外周感觉神经末梢的 MOR 激活后，通过 Gi/o 蛋白通路抑制钠通道的开放，减少动作电位的产生与传导；同时抑制 P 物质等伤害性递质的释放，阻断疼痛信号的外周传入，发挥轻度镇痛作用。
• 肠道免疫调节机制：肠道黏膜免疫细胞的 MOR 激活后，抑制 NF-κB 通路的核转位，减少促炎细胞因子的转录；同时上调紧密连接蛋白（ZO-1、occludin）的表达，增强肠道黏膜屏障的完整性，减少内毒素和抗原的侵入。

三、应用领域与原理

1. 主要应用领域

• 食品营养与肠道健康研究：用于解析牛乳酪蛋白酶解产物的生理活性，评估 β- 酪啡肽在肠道功能调控、肠道微生态平衡中的作用，为功能性乳制品的开发提供理论依据。
• 胃肠道疾病研究：用于腹泻、肠易激综合征（IBS）等疾病的细胞模型与动物模型研究，探索外周阿片受体靶向治疗策略，开发低副作用的胃肠道药物。
• 外周镇痛研究：用于轻度炎性痛、术后痛的外周镇痛机制研究，评估 β- 酪啡肽作为外周镇痛药的潜力，避免中枢阿片类药物的副作用。
• 阿片肽受体亚型选择性研究：作为 MOR 中度选择性激动剂，用于体外受体结合实验，解析 MOR 与配体结合的结构基础，为新型阿片受体靶向药物设计提供数据支持。

2. 应用原理

• 功能性乳制品研发原理：通过体外酶解牛乳 β- 酪蛋白，分离纯化得到 β- 酪啡肽，检测其对肠道平滑肌收缩的抑制活性；在小鼠腹泻模型中，灌胃给予该肽段，记录腹泻频率和粪便含水量，评估其止泻效果；同时检测肠道菌群组成，分析对肠道微生态的影响。
• 肠易激综合征研究原理：在大鼠肠易激综合征模型中，灌胃给予 β- 酪啡肽（剂量 10 mg/kg），检测胃肠道蠕动速率、内脏高敏感性及肠道炎症因子水平；通过预先注射外周 MOR 拮抗剂（如甲基纳曲酮），验证作用的受体特异性和外周靶向性。
• 外周镇痛研究原理：在大鼠角叉菜胶炎性痛模型中，局部注射 β- 酪啡肽（剂量 5 mg/kg），检测机械痛阈和热痛阈的变化；通过检测局部组织中 P 物质的含量，明确其外周镇痛机制；对比中枢给予吗啡的镇痛效果和副作用，评估其临床应用潜力。

四、研究进展

1. 肠道靶向递送优化：将 β- 酪啡肽包埋于壳聚糖 - 海藻酸钠微球中，构建肠道靶向递送系统，微球可在胃酸中稳定存在，到达肠道后释放肽段；在小鼠模型中，该递送系统使肽段的肠道滞留时间延长至 24 小时，止泻活性提升 3 倍。
2. 受体选择性增强：通过定点突变 N 端的 Pro 为 D-Pro，得到衍生物 [D-Pro²]-β-Casomorphin (human)，对 MOR 的选择性提升 10 倍，外周镇痛活性增强 5 倍，且完全无中枢副作用，更适用于外周镇痛药物开发。
3. 联合益生菌应用：研究发现，β- 酪啡肽与双歧杆菌联合使用，在大鼠肠道炎症模型中可协同增强肠道黏膜屏障功能，炎症因子水平降低 60%，效果显著优于单一干预；其机制与肽段促进益生菌增殖、益生菌增强肽段稳定性有关。

五、相关案例分析

1. 肠道功能调控案例：在小鼠离体回肠收缩实验中，加入 10 μmol/L 的 β- 酪啡肽后，回肠收缩频率降低 40%，收缩幅度降低 35%；预先加入甲基纳曲酮（外周 MOR 拮抗剂）后，抑制作用完全消失，证实其作用依赖外周 MOR 激活。
2. 外周镇痛案例：在大鼠角叉菜胶足跖肿胀炎性痛模型中，局部注射 5 mg/kg 的 β- 酪啡肽后，机械痛阈提升 30%，热痛阈提升 25%；连续给药 7 天无明显耐受现象，且未观察到呼吸抑制、便秘等副作用，优于吗啡的外周给药效果。
3. 肠道微生态调节案例：在小鼠抗生素相关性腹泻模型中，灌胃给予 β- 酪啡肽（10 mg/kg）后，肠道双歧杆菌数量提升 2 倍，大肠杆菌数量降低 50%；腹泻频率降低 45%，粪便含水量恢复至正常水平，证实其可通过调节肠道菌群改善腹泻症状。