BSA-AF488，AF488荧光染料标记牛血清白蛋白，物理性质

BSA-AF488 是牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA）与荧光染料 Alexa Fluor 488 通过共价偶联形成的荧光标记蛋白复合物。BSA 是一种来源于牛血清的可溶性蛋白，具有高稳定性和丰富的赖氨酸残基，可作为载体或阻断剂用于生物学实验。Alexa Fluor 488 是绿色荧光染料，具有高量子产率、良好的光稳定性和水溶性。通过 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯或其他活性端与 BSA 的赖氨酸残基共价结合，形成 BSA-AF488。

BSA-AF488 结合了 BSA 的生物相容性和 Alexa Fluor 488 的荧光特性，是一种理想的荧光标记工具，可用于荧光免疫分析、细胞成像、分子追踪、流式细胞分析及高通量检测。其激发波长约为493 nm，发射波长约为518 nm，信号强、光稳定性高，适合在复杂生物体系中使用。

化学特性

BSA 蛋白特性

BSA 是一种单体球状蛋白，分子量约为66 kDa，由单链 583 个氨基酸组成。

蛋白表面有大量赖氨酸残基、半胱氨酸和羧基基团，为化学偶联提供反应位点。

BSA 具有较高的化学稳定性和可溶性，在 pH 4–9 的缓冲体系中稳定。

由于其生物相容性和低免疫原性，BSA 常作为载体蛋白或阻断剂。

Alexa Fluor 488 特性

Alexa Fluor 488 是绿色荧光染料，属于磺化荧光素衍生物。

激发波长 493 nm，发射波长 518 nm，量子产率高，光稳定性强。

NHS 酯或其他活性衍生物可在温和条件下与蛋白质的胺基反应形成稳定酰胺键。

共价偶联化学

BSA-AF488 通过 Alexa Fluor 488 的 NHS 酯端与 BSA 中赖氨酸 ε-氨基共价结合。

形成稳定酰胺键，偶联后荧光染料牢固附着于蛋白质，不易脱落。

偶联反应温和（pH 7.4–8.5，室温），避免破坏蛋白质的空间结构和功能。

偶联度可调，通过控制染料与 BSA 的摩尔比实现荧光强度的优化。

物理性质

外观与溶解性

BSA-AF488 通常为淡绿色至绿色溶液，粉末可溶于缓冲液。

在 PBS、Tris 或 HEPES 等常用缓冲液中保持高溶解性，不易沉淀。

溶液呈稳定荧光，可直接用于生物标记实验。

光学特性

激发峰：约 493 nm

发射峰：约 518 nm

发射峰窄，信号亮度高，便于多通道共定位实验。

光漂白速率低，可用于长时间显微成像和重复扫描实验。

稳定性

干燥或低温保存可长期稳定。

在缓冲液中稳定性好，pH 7.0–8.5 条件下荧光保持良好。

对轻微温度变化和离子强度敏感性低，可适应多种生物实验条件。

生物学特性

生物相容性

BSA 作为载体蛋白具有低免疫原性和良好的生物相容性。

在细胞实验中使用不会显著干扰细胞代谢或信号传导。

稳定性与抗降解性

BSA-AF488 可在生物体系中保持稳定，避免染料游离或蛋白降解。

荧光染料牢固附着于 BSA，可长期追踪蛋白质分布。

分子功能保持

偶联过程中温和反应条件保证 BSA 的空间结构基本保持完整。

可作为阻断剂或载体，不影响蛋白质的生物学活性。

功能与应用

荧光标记与免疫分析

可用于标记抗原、抗体或其他蛋白质，实现荧光免疫检测（如 ELISA、免疫印迹）。

用于高灵敏度荧光定量分析，信号强且线性范围广。

细胞和组织成像

可作为细胞内或细胞表面荧光探针，实现蛋白质或纳米颗粒在活细胞和组织中的追踪。

绿色荧光适合与蓝色、红色及远红色染料组合，实现多通道共定位实验。

流式细胞分析（FACS）

BSA-AF488 可用于流式细胞多通道分析，识别细胞表面标记或荧光追踪颗粒。

荧光亮度高、光稳定性好，适合长时间测量和多次扫描。

阻断剂和载体功能

BSA 可在免疫染色或ELISA中作为非特异性结合阻断剂，减少背景信号。

荧光标记后的 BSA 可同时发挥阻断和可视化功能。

纳米材料与药物载体标记

可偶联到纳米颗粒、微球或药物载体，用于生物分布追踪和药物动力学研究。

荧光信号强，适合体内和体外实验。

高通量检测

在多孔板实验、酶动力学或药物筛选中，BSA-AF488 可提供高灵敏度和可靠荧光信号。

特点总结

高亮度绿色荧光（激发 493 nm，发射 518 nm），光稳定性优异。

BSA 载体提供良好生物相容性和低免疫原性。

NHS 酯偶联形成稳定酰胺键，荧光牢固附着。

可在缓冲液和细胞环境中长期稳定，耐光漂白。

偶联温和，保持蛋白质功能完整。

适用于免疫分析、细胞成像、流式细胞分析、阻断实验及纳米颗粒追踪。

总结

BSA-AF488 是 BSA 与 Alexa Fluor 488 偶联形成的绿色荧光蛋白复合物，结合了 BSA 的生物相容性与 Alexa Fluor 488 的高亮度荧光信号。其化学结构为荧光染料通过 NHS 酯端与 BSA 赖氨酸残基共价结合形成稳定酰胺键，偶联后荧光亮度高、光稳定性好、溶解性良好，可在细胞、组织和缓冲体系中长期保持稳定。BSA-AF488 可用于荧光标记、免疫分析、细胞和组织成像、流式细胞分析、纳米颗粒追踪及高通量检测，是分子生物学和细胞生物学研究中不可或缺的荧光工具。